Mostrar el registro sencillo del ítem

Identificación de polimorfismo(s) en el gen de la Mieloperoxidasa asociado a infecciones recurrentes por Candida albicans.

dc.contributor.advisorCruz Baquero, Claudia Andrea
dc.contributor.authorRiaño Parra, Lina Marcela
dc.date.accessioned2022-03-03T21:56:22Z
dc.date.available2022-03-03T21:56:22Z
dc.date.issued2019
dc.identifier.urihttps://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/4764
dc.description.abstractLa candidiasis es una infección causada por levaduras del género Candida spp. que se presenta de varias formas dependiendo la zona del cuerpo en la que se localice, como la candidiasis bucal y la candidiasis vulvovaginal. Esto ocurre cuando existe un desequilibrio inmunológico entre el huésped y el hongo; por lo tanto, el organismo desencadena un mecanismo de defensa que involucra células como el neutrófilo, quien actúa como principal mediador de la respuesta inmune innata frente a levaduras, dado a que libera sustancias fungicidas como la Mieloperoxidasa (MPO), enzima presente en los gránulos azurófilos. Sin embargo, se han descrito múltiples causas que pueden generar deficiencia o disfunción de esta enzima como la presencia de polimorfismos en el gen que la codifica; por tal motivo, en este estudio se buscó identificar un posible polimorfismo mediante técnicas moleculares y citoquímicas en muestras de pacientes con antecedentes de candidiasis recurrente, logrando estandarizar la técnica de PCR convencional para la amplificación del gen mpo, la secuenciación de la región amplificada y análisis bioinformáticos de los productos de amplificación hallando un cambio en una base nitrogenada (G291T) ubicada en una región no codificante del gen en estudio.spa
dc.description.tableofcontentsResumen 12 Introducción 13 2. Objetivos 15 2.1 Objetivo general 15 2.2 Objetivos específicos 15 3. Marco teórico 16 3.1 Antecedentes 16 3.2 Candidiasis generalidades 19 3.3 Epidemiología 24 3.4 Diagnóstico 26 3.5 Tratamiento 26 3.6 Fisiopatología e inmunidad de Candida albicans 27 3.7 Los neutrófilos 30 3.8 Mieloperoxidasa 31 3.9 Deficiencia de MPO y susceptibilidad a infecciones 36 3.10 Tipos de polimorfismos genéticos 40 3.11 Diagnóstico deficiencia de MPO 43 3.11.1 Técnicas citoquímicas 43 3.11.2 PCR convencional 43 3.11.3 Secuenciación de ADN 45 4. Metodología 47 4.1 Tipo de investigación 47 4.2 Población 47 4.3 Muestra 47 4.4 Recolección de la muestra 48 4.5 Diseño de primers y análisis Bioinformático 48 4.6 Extracción de ADN 49 4.7 Estandarización PCR convencional para amplificación gen mpo 50 4.7.1 Titulación de ADN 50 4.7.2 Titulación de MgCl2 51 4.7.3 Titulación de primers 51 4.7.4 Temperatura de anillamiento 52 4.8 PCR convencional 52 4.9 Purificación de ADN 54 4.10 Secuenciación 54 4.11 Tinción citoquímica de peroxidasa leucocitaria 55 4.12 Cuadro hemático y FSP 55 5. Resultados56 5.1 Estandarización PCR convencional para amplificación gen mpo 56 5.1.1 Titulación de ADN 56 5.1.2 Titulación de MgCl2 57 5.1.3 Titulación de primers 58 5.1.4 Temperatura de anillamiento 60 5.1.5 PCR convencional 62 5.2 Resultados secuenciación 63 5.2.1 Alineamineto de las secuencias con programa bioinformático BLAST 63 5.2.1.1 Muestra Nº 1: Paciente con diágnostico candidiasis bucal 63 5.2.1.2 Muestra Nº 2: Control negativo 65 5.2.1.3 Muestra Nº 3: Paciente con diágnostico candidiasis vaginal 67 5.2.2 Comparación de alineamientos de secuenciaciones con programa Multalin .69 5.2.3Análisis de electroferogramas de los productos de amplificación de PCR secuenciados de candenas complementarias 71 5.3 Análisis bioinformático de la región del gen mpo amplificado, para determinar la ubicación del polimorfismo hallado en la base de datos NCBI 73 5.4 Comparación de tinción citoquímica y FSP de las muestras en estudio 77 6. Discusión. 81 7. Conclusiones 85 8. Referencias. 86 9. Anexos 95spa
dc.format.extent101p.spa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.language.isospaspa
dc.publisherUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarcaspa
dc.rightsDerechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019spa
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/spa
dc.titleIdentificación de polimorfismo(s) en el gen de la Mieloperoxidasa asociado a infecciones recurrentes por Candida albicans.spa
dc.typeTrabajo de grado - Pregradospa
dc.description.degreelevelPregradospa
dc.description.degreenameBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínicospa
dc.identifier.barcode58653
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias de la Saludspa
dc.publisher.placeBogotá D.Cspa
dc.publisher.programBacteriología y Laboratorio Clínicospa
dc.relation.referencesKullberg BJ, Arendrup MC. Invasive Candidiasis. N Engl J Med [Internet]. 2015;373(15):1445-56. Disponible en: http://www.nejm.org/doi/10.1056/NEJMra1315399spa
dc.relation.referencesSánchez EA. Diagnostico de candidiasis y candidemia en neonatos [Internet]. 2009. p. 40-8. Disponible en: http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis332.pdfspa
dc.relation.referencesPlantinga TS, Johnson MD, Scott WK, Van De Vosse E, Velez Edwards DR, Smith PB, et al. Toll-like receptor 1 polymorphisms increase susceptibility to candidemia. J Infect Dis. 2012;205(6):934-43.spa
dc.relation.referencesfacmed.unam.mx [Internet].México: Universidad Nacional Autónoma de México; [Última modificación 4 enero 2016; citado 03 may 2018]. Disponible en: http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/micologia/candidosis.htmlspa
dc.relation.referencesQuindós G. Epidemiology of candidaemia and invasive candidiasis. A changing face. Rev Iberoam Micol [Internet]. 2014;31(1):42-8. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.riam.2013.10.001spa
dc.relation.referencesPappas PG. Invasive Candidiasis. Infect Dis Clin North Am. 2006;20(3):485- 506.spa
dc.relation.referencesSobel JD. Vulvovaginal candidosis. Lancet. 2007;369(9577):1961-71.spa
dc.relation.referencesPemán J, Quindós G. Aspectos actuales de las enfermedades invasoras causadas por Candida y otros hongos levaduriformes. Rev Iberoam Micol [Internet]. 2016;33(3):133-9. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.riam.2015.10.001spa
dc.relation.referencesKlebanoff SJ. Myeloperoxidase: friend and foe. J Leukoc Biol [Internet]. 2005;77(5):598-625. Disponible en: http://www.jleukbio.org/cgi/doi/10.1189/jlb.1204697spa
dc.relation.referencesKolaczkowska E, Kubes P. Neutrophil recruitment and function in health and inflammation. Nat Rev Immunol [Internet]. 2013;13(3):159-75. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1038/nri3399spa
dc.relation.referencesNauseef WM. Myeloperoxidase in human neutrophil host defence. Cell Microbiol. 2014;16(8):1146-55.spa
dc.relation.referencesCassone A. Vulvovaginal Candida albicans infections: Pathogenesis, immunity and vaccine prospects. BJOG An Int J Obstet Gynaecol. 2015;122(6):785-94.spa
dc.relation.referencesCararach Tur M, Comino Delgado R, Davi Armengol E, Marimon García E, Martínez Escoriza JC, Palacios Gil-Antuñano S, et al. La vulvovaginitis candidiásica recurrente. Progresos Obstet y Ginecol. 2013;56(2):108-16.spa
dc.relation.referencesDuque CM, Uribe OL, Soto AF, Alarcón J. Candidiasis vulvovaginal en un grupo mujeres gestantes de Medellín. Infectio [Internet]. 2009;13(1):14-20. Disponible en: http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0123939209701390spa
dc.relation.referencesYano J, Peters BM, Noverr MC, Fidel PL. Novel mechanism behind the immunopathogenesis of vulvovaginal candidiasis: «neutrophil anergy». Infect Immun. 2018;86(3).spa
dc.relation.referencesKlebanoff SJ, Kettle AJ, Rosen H, Winterbourn CC, Nauseef WM. Myeloperoxidase: a front-line defender against phagocytosed microorganisms. J Leukoc Biol [Internet]. 2013;93(2):185-98. Disponible en: http://www.jleukbio.org/cgi/doi/10.1189/jlb.0712349spa
dc.relation.referencesCaratachea MAC. Polimorfismos geneticos: Importancia y aplicaciones. Rev del Inst Nac Enfermedades Respir. 2007;20(3):213-21.spa
dc.relation.referencesOtero RE, Peñamaría MM, Rodríguez PM, Martín BB. Candidiasis oral en el paciente mayor. Av Odontoestomatol. 2015;31(3):135-48.spa
dc.relation.referencesGutiérrez HB, Machín MO, González JS, Arteaga DY. Candidiasis Invasora , presentación y evolución de un caso clínico . 4:1-7.spa
dc.relation.referencesHomme M, Tateno N, Miura N, Ohno N, Aratani Y. Myeloperoxidase deficiency in mice exacerbates lung inflammation induced by nonviable Candida albicans. Inflamm Res. 2013;62(11):981-90.spa
dc.relation.referencesCuenca-Estrella M. Infecciones por candida spp. infecciones superficiales y profundas. Med - Programa Form Médica Contin [Internet]. 2002;8(68):3615- 24. Disponible en: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0304541202706756spa
dc.relation.referencesPaz Cabrera González V, Marcela Hernández Ríos Mauricio Garrido Flores D, García Sesnich J. Dientes Con Periodontitis Apical Asintomática (Paa) Y Absceso Apical Agudo (Aaa)spa
dc.relation.referencesRodríguez ortega judy, miranda tarragó josefa, morejón lugones haydée, santana garay julio c. candidiasis de la mucosa bucal: revisión bibliográfica. rev cubana estomatol [internet]. 2002 ago [citado 2018 ago 01] ; 39( 2 ): 187- 233. disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=s0034- 75072002000200007&lng=esspa
dc.relation.referencesGuadalupe N, Mancera I, Bonilla CR, Ayala JL. de prótesis dentales en pacientes de la Clínica Odontológica. 2017;74(2):74-8.spa
dc.relation.referencesStaines A, Gonzalez M, Guidos H, Hernandez V, Espinosa F.Inmunodeficiencias por alteraciones en las celulas fagocitarias: Un desafío para la pediatría. Alergía, Asma e inmunología pedriátricas. 2005; 14 (1): 5-9.spa
dc.relation.referencesPahwa r, jialal i. myeloperoxidase deficiency. [updated 2017 dec 17]. in: statpearls [internet]. treasure island (fl): statpearls publishing; 2018 jan-. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/nbk470278/spa
dc.relation.referencesSerrato Díaz A, Flores Rentería L, Aportela Cortez J, Sierra Palacios E. PCR : reacción en cadena. Herramientas Mol Apl en Ecol Teor y prácticos. 2014;53-74.spa
dc.relation.referencesStrzepa A, Pritchard KA, Dittel BN. Myeloperoxidase: A new player in autoimmunity. Cell Immunol. 2017;317(January):1-8.spa
dc.relation.referencesMurillo S. Incidencia de Candidiasis Vaginal en mujeres gestantes entre las edades comprendidas de 20 a los 35 años de edad atendidas en el Hospital Verdi Cevallos Balda de la ciudad de Portoviejo,2012-2013. 2013;70. Disponible en: http://repositorio.ug.edu.ec/bitstream/redug/1786/1/Tesis Sandra Murillo.pdfspa
dc.relation.referencesYnca J, Especies de candida implicadas en candidiasis pseudomembranosa bucal, en pacientes con cáncer de cabeza y cuello sometidos a radioterapia, del instituto Nacional de enfermedades neoplásicas y Hospital Nacional Edgardo Rebagliati Martins [Para obtener el titulo profesional de cirujano dentista]. Lima: Universidad Nacional Myor de San Marcos : 2005spa
dc.relation.referencesPineda J, Cortés AÁ, Uribarrem T del N jesus, Castañón LR. Artículo de Revisión Candidosis vaginal. Revisión de la literatura y situación de México y otros países latinoamericanos. Rev Médica Risaralda. 2017;23(1):38-44.spa
dc.relation.referencesPemán J, Quindós G. Aspectos actuales de las enfermedades invasoras causadas por Candida y otros hongos levaduriformes. Rev Iberoam Micol [Internet]. 2016;33(3):133-9. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.riam.2015.10.001spa
dc.relation.referencesSilk H. Diseases of the mouth. Prim Care - Clin Off Pract [Internet]. 2014;41(1):75-90. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.pop.2013.10.011spa
dc.relation.referencesUniversitario H, Samaritana DELA, Jiménez LF, Granados CE. Indice. 2012;spa
dc.relation.referencesIzquierdo, G., & Santolaya, M. E. (2014). Candidiasis invasoras en recién nacidos: diagnóstico, tratamiento y prevención. Revista Chilena de Infectología, 31(1), 73–83. doi:10.4067/s0716-10182014000100011spa
dc.relation.referencesAlburquenque C, Tapia C V. Interacción Candida albicans -Hospedero : un proceso complejo en el que la inmunidad innata juega un importante papel. Bol Micol. 2013;28(2):37-47.spa
dc.relation.referencesOtero Rey, E., Peñamaría Mallón, M., Rodríguez Piñón, M., Martín Biedma, B., & Blanco Carrión, A. (2015). Candidiasis oral en el paciente mayor. Avances En Odontoestomatología, 31(3), 135–148. doi:10.4321/s0213- 12852015000300004spa
dc.relation.referencesVélez Tobón Gabriel Jaime, Rocha Arrieta Yermis Carolina, Arias Sierra Andrés Augusto, López Quintero Juan Álvaro. Función del sistema NADPH oxidasa en la formación de trampas extracelulares de los neutrófilos (NETs). Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter [Internet]. 2016 Mar [citado 2018 Ago 29] ; 32( 1 ): 43-56. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864- 02892016000100005&lng=es.spa
dc.relation.referencesMicrobiología e inmunología [internet] México: Universidad de Carolinadel Sur, Instituto Politecnico Nacional. Disponible en: http://www.microbiologybook.org/Spanish-immuno/imm-chapter1.htmspa
dc.relation.referencesDeLeo FR, Goedken M, McCormick SJ, Nauseef WM. A novel form of hereditary myeloperoxidase deficiency linked to endoplasmic reticulum/proteasome degradation. J Clin Invest. 1998;101(12):2900-9.spa
dc.relation.referencesNauseef WM, Cogley M, McCormick S. Effect of the R569W missense mutation on the biosynthesis of myeloperoxidase. J Biol Chem. 1996;271(16):9546-9.spa
dc.relation.referencesNauseef WM, McCormick S, Goedken M. Impact of missense mutations on biosynthesis of myeloperoxidase. Redox Rep [Internet]. 2000;5(4):197-206. Disponible en: http://www.tandfonline.com/doi/full/10.1179/135100000101535753spa
dc.relation.referencesKhan academy [Internet] Secuenciación de AND; 2018 Disponible en: https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna sequencing-pcr-electrophoresis/a/dna-sequencingspa
dc.relation.referencesPinilla G, Cruz A, Chavarro B. Herramientas de bioinformática en la web, descripción y aplicaciones.spa
dc.relation.referencesShendure J, Balasubramanian S, Church GM, Gilbert W, Rogers J, Schloss JA, et al. DNA sequencing at 40: Past, present and future. Nature [Internet]. 2017;550(7676):345-53. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1038/nature24286spa
dc.relation.referencesDing G, Liu F, Shen B, Feng C, Xu J, Ding Q. The association between polymorphisms in prooxidant or antioxidant enzymes (Myeloperoxidase, SOD2, and CAT) and genes and prostate cancer risk in the chinese population of han nationality. Clin Genitourin Cancer. 2012;10(4):251-5.spa
dc.relation.referencesDing G, Liu F, Feng C, Xu J, Ding Q. Asociación entre los polimorfismos de genes de mieloperoxidasa y la susceptibilidad a cáncer de próstata: Un estudio caso-control en la población de nacionalidad china. Actas Urol Esp. 2013;37(2):79-82.spa
dc.relation.referencesMarchetti C, Patriarca P, Solero G Pietro, Baralle FE, Romano M. Genetic Characterization of Myeloperoxidase Deficiency in Italy. Hum Mutat. 2004;23(5):496-505.spa
dc.relation.referencesMilligan KL, Mann D, Rump A, Anderson VL, Hsu AP, Kuhns DB, et al. Complete Myeloperoxidase Deficiency: Beware the “False-Positive” Dihydrorhodamine Oxidation. J Pediatr [Internet]. 2016;176:204-6. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.jpeds.2016.05.047spa
dc.relation.referencesPatıroğlu T, Eke Güngör H, Belohradsky JS, Unal E, Klein C. Myeloperoxidase deficiency: the secret under the flag of unstained cell. Turkish J Haematol Off J Turkish Soc Haematol [Internet]. 2013;30(2):232-3. Disponible en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24385801%5Cnhttp://www.pubmedcentra l.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=PMC3878482spa
dc.relation.referencesAratani Y, Kura F, Watanabe H, Akagawa H, Takano Y, Suzuki K, et al. In vivo role of myeloperoxidase for the host defense. Jpn J Infect Dis. 2004;57(5):2004.spa
dc.relation.referencesAratani, Y., Kura, F., Watanabe, H., Akagawa, H., Takano, Y., Suzuki, K., Koyama, H. (2000). Differential Host Susceptibility to Pulmonary Infections with Bacteria and Fungi in Mice Deficient in Myeloperoxidase. The Journal of Infectious Diseases, 182(4), 1276–1279. doi:10.1086/315843.çspa
dc.relation.referencesNunoi, H., Kohi, F., Kajiwara, H., & Suzuki, K. (2003). Prevalence of Inherited Myeloperoxidase Deficiency in Japan. Microbiology and Immunology, 47(7), 527–531. doi:10.1111/j.1348-0421.2003.tb03414.spa
dc.relation.referencesPersad AS, Kameoka Y, Suzuki K. Arginine to Cysteine Mutation ( R499C) Found in a Japanese Patient With Complete Myeloperoxidase Deficiency. 2018;13:67-71.spa
dc.relation.referencesWilliam J W, Ernest B, Allan J. E, Marshall A. L, Hematología. Vol 2. Cuarta edición. E.E. U. U, New York. 1999spa
dc.relation.referencesKhan, A., Alsahli, M., & Rahmani, A. (2018). Myeloperoxidase as an Active Disease Biomarker: Recent Biochemical and Pathological Perspectives. Medical Sciences, 6(2), 33 doi:10.3390/medsci6020033spa
dc.relation.referencesGarcía Morales Onel H, Pereira Roche Nayade, Flores Sánchez Rosa M. Enzimas generadoras de especies reactivas del oxígeno: mieloperoxidasa. Rev Cubana Invest Bioméd [Internet]. 1998 Dic [citado 2018 Ago 30]; 17 (3): 190- 197. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S08640300199800030000 2&lng=es.spa
dc.relation.referencesHebecker, B., Naglik, J. R., Hube, B., & Jacobsen, I. D. (2014). Pathogenicity mechanisms and host response during oral Candida albicans infections. Expert Review of Anti-Infective Therapy, 12(7), 867–879. doi:10.1586/14787210.2014.916210spa
dc.relation.referencesJimnez L. Varón M. Prevalencia de candidemia por Candida Albicans y Candida No Albicans en el Hospital Universitario de la Samaritana 2008-2011 [Postgrado Medicina Interna]. Universidad de la Sabana; 2012. 33 p.spa
dc.relation.referencesBioinformatics at COMAV, n.d, Bioinformatics at COMAV Secuenciación de Sanger [internet] [31 septiembre 2018]. Disponible en: https://bioinf.comav.upv.es/courses/intro_bioinf/sanger.htmlspa
dc.relation.referencesProkopowicz, Z., Marcinkiewicz, J., Katz, D. R., & Chain, B. M. (2011). Neutrophil Myeloperoxidase: Soldier and Statesman. Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 60(1), 43–54. doi:10.1007/s00005-011-0156-8spa
dc.relation.referencesZhang, T., Shan, K.-R., Tu, X., He, Y., Pei, J.-J., & Guan, Z.-Z. (2013). Myeloperoxidase Activity and Its Corresponding mRNA Expression as well as Gene Polymorphism in the Population Living in the Coal-Burning Endemic Fluorosis Area in Guizhou of China. Biological Trace Element Research, 152(3), 379–386. doi:10.1007/s12011-013-9632-9spa
dc.relation.referencesOdobasic, D., Kitching, A. R., & Holdsworth, S. R. (2016). NeutrophilMediated Regulation of Innate and Adaptive Immunity: The Role of Myeloperoxidase. Journal of Immunology Research, 2016, 1–11. doi:10.1155/2016/2349817spa
dc.relation.referencesLabome [Internet] . Argentina: Carbajal A. Extracción y purificación de ADN; [ Actualizado 24 de mayo de 2018; 3 Nov. 2018 ] Disponible en: http://www.labome.es/method/DNA-Extraction-and-Purification.htmlspa
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/closedAccessspa
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)spa
dc.subject.lembInfección
dc.subject.lembPatologías
dc.subject.lembInmunidad celular
dc.subject.lembNeutrófilos
dc.subject.proposalCandidiasisspa
dc.subject.proposalEnzima Mieloperoxidasaspa
dc.subject.proposalDeficiencia enzimáticaspa
dc.subject.proposalPolimorfismosspa
dc.subject.proposalInfecciones recurrentesspa
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fspa
dc.type.coarversionhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85spa
dc.type.contentTextspa
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisspa
dc.type.redcolhttps://purl.org/redcol/resource_type/TPspa
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersionspa
dc.rights.coarhttp://purl.org/coar/access_right/c_14cbspa


Ficheros en el ítem

Thumbnail
Nombre:
PRESENTACIÓN TESIS IDENTIFICACIÓN ...
Tamaño:
1.624Mb
Formato:
PDF
Ver/
Thumbnail
Nombre:
TESIS POLIMORFISMOS GEN MIELOP ...
Tamaño:
3.356Mb
Formato:
PDF
Ver/
Thumbnail
Nombre:
TESIS POLIMORFISMOS GEN MIELOP ...
Tamaño:
40.68Kb
Formato:
PDF
Ver/

Este ítem aparece en la(s) siguiente(s) colección(ones)

Mostrar el registro sencillo del ítem

Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019
Excepto si se señala otra cosa, la licencia del ítem se describe como Derechos Reservados - Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2019