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Evaluación de la actividad antibacteriana de péptidos sintéticos análogos de la buforina II contra escherichia coli, pseudomonas aeruginosa y staphylococcus aureus

dc.contributor.advisorEstupiñán Torres, Sandra Mónica
dc.contributor.authorHernández Cardona, Angie Katherine
dc.date.accessioned2021-06-11T21:52:15Z
dc.date.available2021-06-11T21:52:15Z
dc.date.issued2019-09
dc.identifier.urihttps://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/229
dc.description.abstractEl uso indiscriminado de antibióticos convencionales usados en el tratamiento de infecciones causadas por microorganismos ha generado aumento en la tasa de resistencia bacteriana, esta problemática es considerada como una amenaza creciente para la salud pública a nivel mundial1. La resistencia a los antibióticos (RA) se produce cuando las bacterias mutan en respuesta al uso inadecuado y/o innecesario de estos fármacos2. Dentro de este contexto, actualmente se buscan nuevas alternativas terapéuticas que mitiguen esta problemática. Entre estas opciones se encuentran los péptidos antimicrobianos (PAMs), los PAMs son importantes moléculas efectoras del sistema inmune innato, el cual es el principal mecanismo de defensa para la mayoría de los organismos vivos durante las etapas iniciales de infección bacteriana y han exhibido un amplio espectro de actividad antibacteriana que incluye bacterias Gram positivas como Gram negativas3. En la actualidad, hay más de 2000 secuencias peptídicas reportadas relacionadas a PAMs, son secuencias relativamente cortas, generalmente conformadas entre 10 a 50 aminoácidos3. Dentro de los PAMs, encontramos la Buforina II (BFII), péptido sintético derivado de la Buforina I (BFI), el cual se encuentra en el tejido estomacal del sapo asiático Bufo gargarizans. La BFII es un péptido de 21 aminoácidos, el cual ha exhibido mayor actividad antibacteriana que la BFI frente a cepas bacterias Gram positivas como Gram negativas4. En este trabajo se evaluó la actividad antibacteriana de 8 péptidos sintéticos lineales derivados del motivo mínimo antibacteriano de la BFII (32RLLR35), contra E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa ATCC 27853 y S. aureus ATCC 25923. Nuestros resultados permitieron identificar secuencias peptídicas con amplio espectro de actividad cuyas concentraciones mínimas inhibitorias (CMIs) variaron en un rango de concentración de 38 μM a 259 μM. De manera general los péptidos palindrómicos presentaron mejor actividad frente a las cepas evaluadas. Los resultados de este trabajo sugieren que la incorporación de Cys y Ahx sobre secuencias palindrómicas derivadas de la BFII incrementan la actividad antibacteriana.spa
dc.description.tableofcontents1. Antecedentes 13 2. Marco referencial 19 2.1 Péptidos antimicrobianos 19 2.1.1 Generalidades 19 2.1.2 Alcance clínico 20 2.4 Resistencia antibacteriana 21 2.4.1 Antecedentes 21 2.4.2 Causas 22 2.4.3 Listado de cepas de mayor importancia actualmente 22 2.3 Buforina 23 2.4 Estructuras empleadas para potenciar la actividad antibacteriana de los PAMs 25 2.4.1 Estructuras con presentación multiple del motivo activo (Péptidos polivalentes) 25 2.4.2 Estructuras palindrómicas 25 2.4.3 Sustitución de residios de Arginina (Arg) por Lisina (Lys) 26 2.4.4 Incorporación de aminoácidos no naturales 27 2.5 Bacterias Gram negativas 27 2.5.1 Escherichia 27 2.5.1.1 Escherichia coli 28 2.5.1.1.1 Escherichia coli (Migula) Castellani y Chalmers (ATCC ® 43827 ™ 29 2.5.2Pseudomonas 29 2.5.2.1 Pseudomonas aeruginosa 30 2.5.2.1.1 Pseudomonas aeruginosa (Schroeter) Migula (ATCC® 27853™) 31 2.6 ...... Bacterias Gram positivas 31 2.6.1 Staphylococcus 31 2.6.1.1 Staphylococcus aureus 32 2.6.1.1 . Staphylococcus aureus subsp. aureus Rosenbach (ATCC ® 25923 ™) 33 3. Diseño metodologico 34 3.1 Constantes 34 3.1.1 Universo 34 3.1.2 Población 34 3.1.3 Muestra 34 3.2 Hipótesis 34 3.3 Variables 34 3.3.1 Dependiente 34 3.3.2 Independiente 34 3.4 Indicadores 35 3.5 Técnicas y procedimientos 35 3.5.1 Reactivos y materiales 33 3.5.1.1 Cepas bacterianas 34 3.5.1.2 Péptidos sintéticos evaluados derivados de la BFII 34 3.5.2 Procedimientos 35 3.5.2.1 Activación y almacenamiento de las cepas bacterianas ATCC 35 3.5.2.2 Obtención de péptidos de BFII 37 3.5.2.3 Concentración mínima inhibitoria 38 3.5.2.4 Concentración mínima bactericida 38 3.5.2.5 Actividad hemolítica 38 3.5.2.6 Curvas de letalidad-muerte 39 4. Resultados y discusión 40 4.1 Concentración mínima inhibitoria y concentración minima bactericida 40 4.2 Porcentaje de hemólisis de péptidos derivados de la BFII 43 4.3 Cinética de la actividad antibacteriana de los péptidos derivados de BFII 45 6. Conclusiones 47 7. Referencias bibliograficas 48 ANEXO A. Absorbancias de las CMI y CMB 54 ANEXO B. Porcentaje de hemólisis 60 ANEXO C. Curvas de letalidad 61spa
dc.format.extent63p.spa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.language.isospaspa
dc.publisherUniversidad Colegio Mayor de Cundinamarcaspa
dc.relation.ispartofNo objeto asociado
dc.rightsDerechos Reservados -Universidad Colegio Myor de Cundinamarca ,2019eng
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/spa
dc.titleEvaluación de la actividad antibacteriana de péptidos sintéticos análogos de la buforina II contra escherichia coli, pseudomonas aeruginosa y staphylococcus aureusspa
dc.typeTrabajo de grado - Pregradospa
dc.contributor.researchgroupTrabajo de investigaciónspa
dc.coverage.cityBogotá D.C.
dc.description.degreelevelPregradospa
dc.description.degreenameBacteriólogo(a) y Laboratorista Clínicospa
dc.description.researchareaTrabajo de investigaciónspa
dc.identifier.barcode60151
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias de la Saludspa
dc.publisher.placeBogotá, Distrito Capitalspa
dc.publisher.programBacteriología y Laboratorio Clínicospa
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Derechos Reservados -Universidad Colegio Myor de Cundinamarca ,2019
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