Caracterización bioquímica de Bacillus Thuringiensis Serovar Coreanensis 4al1 (t25001) en relación a su actividad hacia células cáncerigenas
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Estupiñán Torres, Sandra Mónica | 2020-06-02
Las proteínas parasporina (PS) son sintetizadas en la fase de esporulación de Bacillus
thuringiensis (Bt), una bacteria Gram positiva ampliamente estudiada por actividad
insecticida debida a sus toxinas altamente específicas (proteínas Cry). Las PS son una clase
de proteínas Cry, y tienen actividad citotóxica y especifica frente a células cancerosas,
induciéndoles muerte celular por necrosis o apoptosis, además de poseer baja o nula
actividad sobre las células con funcionamiento normal. Se han descrito varias cepas
portadoras de actividad anticancerígena: Bt coreanensis, Bt dakota o Bt colmeri. En este
trabajo se decidió caracterizar la cepa de Bt coreanensis 4AL1, en relación a posible
actividad anticancerígena mediada por PS. Para este fin, se diseñaron oligonucleótidos
específicos para cada uno de los grupos de PS (PS1, PS2, PS3, PS4, PS5, y PS6)
registrados en Bacillus thuringiensis toxin nomenclature, tanto para identificar la presencia
del gen como para su posterior aislamiento. En segunda instancia se estudió la cepa de Bt
coreanensis 4AL1, en el contexto de analizar bioinformáticamente sus genomas en la
búsqueda de genes codificantes de PS, y su caracterización bioquímica in silico, donde se
determinó la presencia de un péptido relacionado con PS2Aa. Finalmente, se utilizó la cepa
Bt coreanensis 4AL1, para obtener ADN genómico por método Hot Shot + Tween, la
purificación de cristales posiblemente asociados a PS, y su determinación mediante SDS-
PAGE, con presencia de una banda de 37 kDa que podría estar asociada a PS2Aa. Este
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trabajo aporta a la caracterización de cepas de Bt, específicamente en el contexto de la
síntesis de PS asociadas a control de cáncer.
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