Estudio Molecular Mediante Reaccion en cadena de la plimerasa del genero brucella, en una poblacion humana de alto riesgo de la sabana de bogota 1998

Abstract

La Brucelosis es una enfermedad zoonótica transmitida de los animales al hombre por bacterias del género Brucella. Los humanos se infectan al consumir alimentos contaminados, por el contacto con animales enfermos o material infectado que incluye cadáveres de animales, membranas fetales, exudados vaginales, fetos o la piel, así como la ingestión de leche no pasteurizada o productos lácteos de animales. Las personas más expuestas son los carniceros, los trabajadores de mataderos, los campesinos, los cuidadores del ganado y los veterinarios.

Esta zoonosis está ampliamente distribuida a escala mundial, ocasionando pérdidas económicas y problemas de salud pública debido a la falta de un diagnóstico oportuno y confiable.

Actualmente esta identificación se realiza mediante pruebas serológicas e inmunológicas que, en algunos casos, dan como resultado falsos positivos al presentarse reacciones cruzadas con otros microorganismos; la prueba más confiable es el cultivo bacterológico en donde se aísla el microorganismo, sin embargo, esta implica largos períodos de tiempo para obtener los resultados.

Teniendo en cuenta que el diagnóstico de Brucella por medios convencionales no ofrece resultados rápidos, sospechables, específicos y oportunos, se han implementado técnicas de detección molecular mediante la "Reacción en Cadena de la Polimerasa" (PCR), que son útiles en el diagnóstico y la diferenciación de agentes infecciosos, ofreciendo sensibilidad, rapidez y especificidad.

El presente estudio está diseñado para identificar Brucella en las personas de alto riesgo que trabajan en la Facultad de Veterinaria de la Universidad Nacional de Colombia, quienes se ofrecieron a participar voluntariamente. En ellos se tomaron muestras de sangre, a las cuales se les realizó la extracción de ADN para la posterior amplificación por PCR. Para ello fue necesario primero estandarizar la técnica, utilizando como controles dos cepas conocidas de Brucella (B. abortus biovariedad 1 y B. melitensis biovariedad 1), junto con seis muestras de animales con serología positiva para Brucella. De esta forma se pudo comparar si el diagnóstico clínico y la prueba serológica coincidían con los resultados arrojados por la PCR.

Una vez realizadas estas pruebas, se encontró que las 50 muestras de humanos utilizadas para este estudio y analizadas subsecuentemente con la prueba serológica de Rosa de Bengala presentaron un 100% de negatividad, en tanto que con la prueba de PCR dos muestras fueron positivas por presentar las bandas características del género Brucella.