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Caracterización bioquímica de Bacillus Thuringiensis Serovar Coreanensis 4al1 (t25001) en relación a su actividad hacia células cáncerigenas
dc.contributor.advisor | Estupiñán Torres, Sandra Mónica | |
dc.contributor.advisor | López Pazos, Silvio Alejandro | |
dc.contributor.author | Becerra Manrique, Ana María | |
dc.date.accessioned | 2021-05-19T15:22:20Z | |
dc.date.available | 2021-05-19T15:22:20Z | |
dc.date.issued | 2020-06-02 | |
dc.identifier.uri | https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/62 | |
dc.description.abstract | Las proteínas parasporina (PS) son sintetizadas en la fase de esporulación de Bacillus thuringiensis (Bt), una bacteria Gram positiva ampliamente estudiada por actividad insecticida debida a sus toxinas altamente específicas (proteínas Cry). Las PS son una clase de proteínas Cry, y tienen actividad citotóxica y especifica frente a células cancerosas, induciéndoles muerte celular por necrosis o apoptosis, además de poseer baja o nula actividad sobre las células con funcionamiento normal. Se han descrito varias cepas portadoras de actividad anticancerígena: Bt coreanensis, Bt dakota o Bt colmeri. En este trabajo se decidió caracterizar la cepa de Bt coreanensis 4AL1, en relación a posible actividad anticancerígena mediada por PS. Para este fin, se diseñaron oligonucleótidos específicos para cada uno de los grupos de PS (PS1, PS2, PS3, PS4, PS5, y PS6) registrados en Bacillus thuringiensis toxin nomenclature, tanto para identificar la presencia del gen como para su posterior aislamiento. En segunda instancia se estudió la cepa de Bt coreanensis 4AL1, en el contexto de analizar bioinformáticamente sus genomas en la búsqueda de genes codificantes de PS, y su caracterización bioquímica in silico, donde se determinó la presencia de un péptido relacionado con PS2Aa. Finalmente, se utilizó la cepa Bt coreanensis 4AL1, para obtener ADN genómico por método Hot Shot + Tween, la purificación de cristales posiblemente asociados a PS, y su determinación mediante SDS- PAGE, con presencia de una banda de 37 kDa que podría estar asociada a PS2Aa. Este 9 trabajo aporta a la caracterización de cepas de Bt, específicamente en el contexto de la síntesis de PS asociadas a control de cáncer. | spa |
dc.description.tableofcontents | RESUMEN 8 INTRODUCCIÓN 10 OBJETIVOS 12 Objetivo general 12 Objetivos específicos 12 1. ANTECEDENTES 13 2. MARCO REFERENCIAL 20 2.1. Generalidades de Bacillus thuringiensis 20 2.2 Proteínas de Cry 21 2.3 Mecanismo de acción de Cry 22 2.5 Aplicaciones de parasporina 27 2.6 Modo de acción de las proteínas tipo parasporina 28 2.7 Cáncer 30 3. METODOLOGÍA 33 3.1 Tipo de investigación 33 3.2 Universo 33 3.3 Población 33 3.4 Muestra 33 3.5. Variables 33 3.6. Indicadores 33 3.7. Hipótesis 34 3.8. Técnicas y Procedimientos 34 3.8.1 Microscopia 34 3.8.2 Diseño de oligonucleótidos específicos para genes tipo parasporina 34 3.8.3. Análisis genómico 35 3.8.4 Extracción de ADN 35 3.8.5. Lavado de Biomasa y Solubilización de Proteínas 36 3.8.7 Cuantificación de Proteínas por método Bradford 36 4.1. Caracterización morfológica de B. thuringiensis serovar coreanensis 38 4.1.2. Microscopia 38 4.1.3 Microscopia de contraste de fases 39 4.2 Diseño de oligonucleótido específicos de genes tipo parasporina 40 4.3 Análisis genomico de B. thuringiensis serovar coreanensis 42 4.3.1 Genoma de B. thuringiensis serovar coreanensis cepa ST7 42 4.3.2 Genoma de Bt serovar coreanensis cepa 4AL1 43 4.3.2.1 Análisis de PS5 en el genoma de Bt serovar coreanensis CEPA 4AL1 44 4.3.3 Análisis de secuencia de aminoácidos extraída de la literatura 45 4.4. Características de las proteínas tipo parasporina 46 4.6. Cuantificación de proteínas 47 4.7. Perfiles proteicos 49 5. DISCUSIÓN 50 6. CONCLUSIONES 54 Bibliografía | spa |
dc.format.extent | 83p. | spa |
dc.format.mimetype | application/pdf | spa |
dc.language.iso | spa | spa |
dc.publisher | Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca | spa |
dc.rights | Derechos Reservados-Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2020 | spa |
dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ | spa |
dc.title | Caracterización bioquímica de Bacillus Thuringiensis Serovar Coreanensis 4al1 (t25001) en relación a su actividad hacia células cáncerigenas | spa |
dc.type | Trabajo de grado - Pregrado | spa |
dc.description.degreelevel | Pregrado | spa |
dc.description.degreename | Bacteriólogo(a) y Laboratorista Clínico | spa |
dc.publisher.faculty | Facultad de Ciencias de la Salud | spa |
dc.publisher.place | Bogotá, D.C. | spa |
dc.publisher.program | Bacteriología y Laboratorio Clínico | spa |
dc.relation.references | Socia, Ministerio de Salud y Protección. Observatorio Nacional de cancer Guía Metodológica. 2018. | spa |
dc.relation.references | Salud, Unión Internacional Contra el Cáncer y Organización Mundial de la. ACCIÓN MUNDIAL CONTRA EL CÁNCER. 2005. | spa |
dc.relation.references | TUMOR, AMERICAN BRAIN. Quimioterapia. 2014. | spa |
dc.relation.references | Sauka, Diego . Bacillus thuringiensis: New applications for an old acquaintance? 2017, Vol. 49, 2. | spa |
dc.relation.references | Toshihiko Akiba, y otros. Crystal Structure of the Parasporin-2 Bacillus Crystal Structure of the Parasporin-2 Bacillus. December de 2009, Vol. 386, 23. | spa |
dc.relation.references | Mizuki, Eiichi , y otros. Parasporin, a Human Leukemic Cell-Recognizing Parasporal Protein of Bacillus thuringiensis. March de 2000, Vol. 7, 4. | spa |
dc.relation.references | Ito, Akio, y otros. A Bacillus thuringiensis Crystal Protein with Selective Cytocidal Action to Human Cells. March de 2004, Vol. 279, 29. | spa |
dc.relation.references | Jung, Y‐C. , y otros. Isolation and characterization of a novel Bacillus thuringiensis strain expressing a novel crystal protein with cytocidal activity against human cancer cells. February de 2007, Vol. 103, 25. | spa |
dc.relation.references | OHBA, MICHIO , MIZUKI, EIICHI y UEMORI, AKIKO. Parasporin, a New Anticancer Protein Group from Bacillus thuringiensis. January de 2009, Vol. 29, 1. | spa |
dc.relation.references | Namba, Akitoshi, y otros. The cytotoxicity of Bacillus thuringiensis subsp. coreanensis A1519 strain against the human leukemic T cell. May de 2003, págs. 29-35. | spa |
dc.relation.references | Katayama, Hideki, y otros. Parasporin-1, a Novel Cytotoxic Protein to Human Cells from Non-Insecticidal Parasporal Inclusions of Bacillus thuringiensis. 2005, Vol. 137, 1, págs. 17-25. | spa |
dc.relation.references | Brasseur, Kevin , Auger, Pascal y Asselin, Eric . Parasporin-2 from a New Bacillus thuringiensis 4R2 Strain Induces Caspases Activation and Apoptosis in Human Cancer Cells. July de 2015. | spa |
dc.relation.references | Abe, Yuichi, Shimada, Hiroyasu y Kitada, Sakae . Raft-targeting and Oligomerization of Parasporin-2, a Bacillus thuringiensis Crystal Protein with Anti-Tumour Activity. February de 2008, Vol. 143, 2. | spa |
dc.relation.references | Nadarajah, y otros. SELECTIVE CYTOTOXIC ACTIVITY AGAINST LEUKEMIC CELL LINES FROM MOSQUITOCIDAL BACILLUS THURINGIENSIS PARASPORAL INCLUSIONS. March de 2008, Vol. 39, 2. | spa |
dc.relation.references | NAGAMATSU, Yasunori , y otros. Three Cry Toxins in Two Types from Bacillus thuringiensis Strain M019 Preferentially Kill Human Hepatocyte Cancer and Uterus Cervix Cancer Cells. March de 2010, Vol. 74, 3. | spa |
dc.relation.references | Okumura, Shiro , y otros. Identification of a second cytotoxic protein produced by Bacillus thuringiensis A1470. November de 2013, Vol. 35. | spa |
dc.relation.references | ESPINO VÁZQUEZ, ASTRID NALLELI . CARACTERIZACIÓN BIOLÓGICA DE PARASPORINAS EN CEPAS NATIVAS DE Bacillus thuringiensis. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN. 2014. | spa |
dc.relation.references | de Almeida Melo, André Luiz , Soccol, Vanete y Soccol, Carlos . Bacillus thuringiensis: mechanism of action, resistance, and new applications: a review. July de 2016, Vol. 36. | spa |
dc.relation.references | The distribution pattern of DNA and protoxin in Bacillus thuringiensis as revealed by laser confocal microscopy analysis. Quanfang Hu, y otros. July de 2015, Applied Microbiology and Biotechnology, Vol. 99. | spa |
dc.relation.references | Screening and characterization of a non-insecticidal Bacillus thuringiensis strain producing parasporal protein with selective toxicity against human colon cancer cell lines. Periyasamy, Abirami , y otros. September de 2016, Annals of Microbiology, Vol. 66. | spa |
dc.relation.references | Parasporins 1 and 2: Their structure and activity. Akiba, Toshihiko y Okumura, Shiro. January de 2017, Journal of Invertebrate Pathology, Vol. 142. | spa |
dc.relation.references | Soberón, Mario, y otros. Cell lines as models for the study of Cry toxins from Bacillus thuringiensis. Febrary de 2018, Vol. 93. | spa |
dc.relation.references | A parasporin from Bacillus thuringiensis native to Peninsular India induces apoptosis in cancer cells through intrinsic pathway. Chubicka, Thomas, y otros. June de 2018, Journal of Biosciences, Vol. 43. | spa |
dc.relation.references | Sauka, Diego. Bacillus thuringiensis: ¿nuevas aplicaciones para un viejo conocido? 2017, Vol. 49, 2. | spa |
dc.relation.references | BEEGLE, CLAYTON y YAMAMOT, TAKASHY. INVITATION PAPER (C.P. ALEXANDER FUND): HISTORY OF BACILLUS THURINGIENSIS BERLINER RESEARCH AND DEVELOPMENT. JULY de 1992, Vol. 124. | spa |
dc.relation.references | Sauka, Diego y BENINTENDE, GRACIELA . Bacillus thuringiensis: generalidades: Un acercamiento a su empleo en el biocontrol de insectos lepidópteros que son plagas agrícolas. June de 2008, Vol. 2, 40. | spa |
dc.relation.references | Ochoa, Gustavo y Arrivillaga, Jazzmin. Bacillus thuringiensis: Avances y perspectivas en el control biológico de Aedes aegypti. Diciembre de 2009, Vol. 49, 2. | spa |
dc.relation.references | Herrera, Fernando, y otros. Formulación de un medio de cultivo para la producción de δ-endotoxinas de Bacillus thuringiensis. Noviembre de 2018, Vol. 17. | spa |
dc.relation.references | Grijalba, Erika , y otros. Bacterias entomopatógenas en el control biológico de insectos. Vol. 1. | spa |
dc.relation.references | Jung, Y C, Mizuki, E y , C J. Isolation and characterization of a novel Bacillus thuringiensis strain expressing a novel crystal protein with cytocidal activity against human cancer cells. February de 2007, Vol. 103. | spa |
dc.relation.references | López-Pazos, Silvio Alejandro y Cerón, Jairo . Proteínas Cry de Bacillus thuringiensis y su interacción con coleópteros. December de 2010, Vol. 8, 14. | spa |
dc.relation.references | Portela, Diana Daniela , Chaparro, Alejandro y López, Silvio Alejandro. Bacillus thuringiensis biotechnology in agriculture. December de 2013, Vol. 11, 20. | spa |
dc.relation.references | Fernandez, Luisa E. , y otros. A GPI-anchored alkaline phosphatase is a functional midgut receptor of Cry11Aa toxin in Aedes aegypti larvae. January de 2006, Vol. 394, 21. | spa |
dc.relation.references | Xu, Dong y Côté, Jean-Charles . Sequence Diversity of Bacillus thuringiensis Flagellin (H Antigen) Protein at the Intra-H Serotype Level. September de 2008, Vol. 47, 17. | spa |
dc.relation.references | Mizuki , E, y otros. Unique activity associated with non-insecticidal Bacillusthuringiensis parasporal inclusions: in vitro cell-killing action onhuman cancer cells. Septiembre de 1999, Vol. 86. | spa |
dc.relation.references | Dong-Hyun , Lee, y otros. Microbial ecology of Bacillus thuringiensis: fecal populations recovered from wildlife in Korea. 2003, Vol. 49, 7. | spa |
dc.relation.references | Michio, Ohba, y otros. Naturally occurring Bacillus thuringiensis in oceanic islands of Japan. 2002, Vol. 37, 7. | spa |
dc.relation.references | Michio , Ohba, Naoya , Wasano y Mizuki, Eiichi. Bacillus thuringiensis soil populations naturally occurring in the Ryukyus, a subtropic region of Japan. December de 1999. | spa |
dc.relation.references | Hyung-Hoan, Lee, y otros. New Serovars of Bacillus thuringiensis: B. thuringiensis ser. coreanensis (Serotype H25), B. thuringiensis ser. leesis (Serotype H33), and B. thuringiensis ser. konkukian (Serotype H34). March de 1994, Vol. 63, 2. | spa |
dc.relation.references | Hiromi, AMANO, y otros. A Novel 29-kDa Crystal Protein from Bacillus thuringiensis Induces Caspase Activation and Cell Death of Jurkat T Cells. May de 2005, Vol. 69, 11. | spa |
dc.relation.references | Akitoshi, Namba, y otros. The cytotoxicity of Bacillus thuringiensis subsp. coreanensis A1519 strain against the human leukemic T cell. June de 2003, Vol. 1662, 1. | spa |
dc.relation.references | Identification of Parasporin Genes in Vietnamese Isolates of Bacillus thuringiensis. Koichi, Yasutake, y otros. August de 2007, Z. Naturforsch, Vol. 63. | spa |
dc.relation.references | Parasporins as new natural anticancer agents: a review. Almas , Okassov, y otros. 1, 2015, JBUON , Vol. 20. | spa |
dc.relation.references | DOĞAL BİR ANTİ-KANSER PROTEİN OLAN PARASPORİNLER . KESİK OKTAY, Müjgan y GÜNEŞ , GÜNEŞ . 2, Ağustos de 2017, Anadolu University Journal of Science and Technology C- Life Sciences and Biotechnology, Vol. 6. | spa |
dc.relation.references | Informe sobre la situación mundial de las enfermedades no transmisibles 2010 RESUMEN DE ORIENTACIÓN. Salud, Organización Mundial de la. Ginebra : s.n., 2011. | spa |
dc.relation.references | Latest global cancer data:Cancer burden rises to 18.1 million new cases and 9.6 million cancer deaths in 2018. Thomas, Cours Albert . Septiembre de 2018, International Agency for research on cancer. | spa |
dc.relation.references | El cancer. de la Garza Salazar, Jaime G. y Paula , Juárez Sánchez. La cienncia a tu alcance . | spa |
dc.relation.references | MANUAL DE ENFERMERÍA ONCOLÓGICA. Manzur, Juan . Instituto Nacional del Cáncer. | spa |
dc.relation.references | Conociendo y comprendiendo la célula cancerosa: Fisiopatología del cáncer. N. Catherine , Sánchez. 4, Julio de 2013, Revista Médica Clínica Las Condes, Vol. 24. | spa |
dc.relation.references | Oncogenic Signaling Pathways in The Cancer Genome Atlas. | spa |
dc.relation.references | Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976, Vol. 7, 72. | spa |
dc.relation.references | Specific Cytotoxic Effects of Parasporal Crystal Proteins Isolated from Native Saudi Arabian Bacillus thuringiensis Strains against Cervical Cancer Cells. Mourad A. M. , y otros. 3, 2019, Molecules, Vol. 24. | spa |
dc.relation.references | Biodiversity of Bacillus thuringiensis isolated from peruvian agroecosystem and evaluation of bioinsecticidal potential. Flores , Abad, y otros. 1, s.l. : Ciencia e Investigación, Ciencia e Investigación, Vol. 14. | spa |
dc.relation.references | SELECCIÓN DE CEPAS DE Bacillus spp. PRODUCTORAS DE ANTIBIÓTICOS AISLADAS DE FRUTOS TROPICALES. Ragazzo, Juan Arturo, y otros. 11, s.l. : Revista Chapingo Serie Horticultura 17(, 2011, Vol. 5. | spa |
dc.relation.references | Determination of Bacillus thuringiensis BerlinerIsolates Autochthonous in Cuba. Carreras Solís, Bertha . 2, s.l. : Fitosanidad, 2009, Vol. 13. | spa |
dc.relation.references | Yero Corona, Daniel. De la secuencia de un genoma bacteriano a la identificación de candidatos vacunales. VacciMonito. 1, 2006, Vol. 15. | spa |
dc.relation.references | Multiplex PCR Screening To Detect cry9 Genes in Bacillus thuringiensis Strains. Ben-Dov,, Eitan , y otros. 8, s.l. : Appl Environ Microbiol., 1999, Vol. 65. | spa |
dc.relation.references | PCR-Based Approach for Detection of Novel Bacillus thuringiensis cry Genes. JUA ́REZ-PE ́REZ, V. M., FERRANDIS, M. D y FRUTOS, R. . 8, s.l. : APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, 1997, Vol. 63. | spa |
dc.relation.references | Sievers, Fabian , y otros. Fast, scalable generation of high-quality protein multiple sequence alignments using Clustal Omega. Mol Syst Biol. 7, 2011, Vol. 539. | spa |
dc.relation.references | DIAZ GRANADOS D, CRISTINA , SANDOVAL, ANA MARÍA y CHAPARRO- GIRALDO, ALEJANDRO . DESIGN OF A CRY1Ac SEMISYNTHETIC GENE AND STRUCTURE ANALYSIS OF TRANSLATED PROTEIN. Biotecnología en el Sector Agropecuario y Agroindustria. 2013, Vol. 2. | spa |
dc.relation.references | Cozzone, Alain J. Proteins: Fundamental Chemical Properties. ENCYCLOPEDIA OF LIFE SCIENCES. 2002. | spa |
dc.relation.references | press, Oxford University. Amino Acids, Peptides,and Proteins. [En línea] [Citado el: 30 de Diciembre de 2019.] | spa |
dc.relation.references | Gasteiger, Elisabeth , y otros. Protein Identification and Analysis Tools on the ExPASy Server. The Proteomics Protocols Handbook . 2005. | spa |
dc.relation.references | TORRES CABRA, Eneida, HERNÁNDEZ-FERNÁNDEZ, Javier y PERÉZ RUBIANO, Claudia Constanza. TOTAL PROTEIN OF CRUDE EXTRACTS AND QUANTIFICATION THE NATIVE Bacillus thuringiensis STRAINS ISOLATED FROM BOYACÁ AND CUNDINAMARCA. 2013, Vol. 3, 2. | spa |
dc.relation.references | Ekino, Keisuke, y otros. Cloning and Characterization of a Unique Cytotoxic Protein Parasporin-5 Produced by Bacillus thuringiensis A1100 Strain. 2014, Vol. 6,6. | spa |
dc.rights.accessrights | info:eu-repo/semantics/closedAccess | spa |
dc.rights.creativecommons | Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) | spa |
dc.subject.lemb | Bacillus thuringiensis serovar coreanensis | |
dc.subject.lemb | Parasporina | |
dc.subject.lemb | Cáncer | |
dc.subject.lemb | Oligonucleótido | |
dc.subject.lemb | PS2Aa | |
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