dc.contributor.advisor | Díaz Barrera, Luis Eduardo | |
dc.contributor.author | Hernández Duarte, Dihana Estefanyha | |
dc.date.accessioned | 2021-11-10T19:24:35Z | |
dc.date.available | 2021-11-10T19:24:35Z | |
dc.date.issued | 2018-03 | |
dc.identifier.uri | https://repositorio.unicolmayor.edu.co/handle/unicolmayor/3637 | |
dc.description.abstract | El hallazgo de nuevos compuestos microbianos y de metabolitos secundarios
bioactivos sigue siendo importante en la investigación de nuevos medicamentos. Por
lo cual, se requieren estrategias con el fin de aumentar la probabilidad de conocer
nuevas sustancias y propiedades que disminuyan el tiempo de elaboración y el costo
de los procesos tradicionales de identificación, en la producción de nuevos
medicamentos.
Así entonces, se planteó un estudio mediante la realización de una prueba de
identificación molecular, como la técnica de reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) que permitió detectar a nivel molecular en Actinobacterias aisladas de la ribera
del Río Arauca la presencia de algunos genes biosintéticos pertenecientes a los
complejos Policétido sintasa tipo I: PKSI, Policétido sintasa tipo II: PKSII y Péptido
sintasa no ribosómicos NRPS.
Proceso en el cual se tomaron 30 cepas Pertenecientes a la Universidad de La
Sabana, identificadas dentro del género Streptomyces, en las cuales gen que codifica
para algunas enzimas de los complejos PKSI, PKSII y NRPS, fue amplificado en 18
cepas (60%); a diferencia de 12 (40%) cepas que no presentaron amplificación para
los mismos genes; Se identificaron 6 cepas : 160 (Streptomyces sp), 326
(Streptomyces sp), 412 (Streptomyces sp parvulus ), 445 (Streptomyces sp), 627
(Streptomyces sp) y 270(Streptomyces sp ) con la presencia de los tres genes
seleccionados, correspondientes a los complejos PKSI, PKSII y NRPS.
Se realizó una evaluación de la actividad antimicrobiana por enfrentamiento
directo o antagonismo donde se determinó una actividad antibactérial
preferencialmente hacia bacterias Gram positivas del 67%, comparando estas
evaluaciones con los resultados de la técnica de PCR, indicando que las cepas que
no presentaron amplificación pero si tienen actividad antimicrobiana, pueden producir
antibióticos mediante otros mecanismos diferentes al objeto de estudio de la presente
investigación.
Se concluye que la técnica de PCR disminuye los tiempos de evaluación de
producción de metabolitos antibacteriales en cepas microbiológicas con una alta
eficiencia y a bajos costos (frente a técnicas microbiológicas) aunque se debe ampliar
el grupo de genes a evaluar a otros sistemas de síntesis de compuestos
antibacteriales. | spa |
dc.description.tableofcontents | TABLA DE CONTENIDO
1 Introducción 1
2 Antecedentes 5
3 Marco teórico 9
3.1 Actinomicetes 9
3.2 Policétidos 10
3.3 Biosíntesis de policétidos y péptidos no ribosomales 11
3.3.1 Biosíntesis de policétidos tipo PKS I y PKS II 11
3.3.2 Biosíntesis de péptidos no ribosomales 16
4 OBJETIVOS 19
4.1 OBJETIVO GENERAL 19
4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS 19
5 Diseño metodológico 20
5.1 Tipo de investigación 20
5.2 Población 20
5.3 Muestra 20
5.4 Hipótesis 20
5.5 Variables 21
5.6 Técnicas y procedimientos 22
5.6.1 Activación de actinomicetos 22
5.6.2 Identificación morfológica 23
5.6.3 Actividad antimicrobiana 23
5.6.4 Extracción de ADN 24
5.6.4.1 5.6.4.1 Amplificación del gen 16S rRNA 25
5.6.4.2 5.6.4.2 Identificación y presencia de genes mediante PCR 26
5.6.4.3. Secuenciación 28
6 Análisis estadístico 28
7 Resultados 28
7.1 . Cultivos 29
7.1.1. Activación de actinomicetos 29
7.1.2 Identificación morfológica 31
7.1.2.1 Características Macroscópicas 31
7.1.2.2 Características Microscópicas 32
7.1.3 Actividad antimicrobiana 33
7.2 Interpretación de datos por técnica de enfrentamiento directo 35
8 Identificación Molecular 36
8.1 Extracción de ADN 36
8.2 Amplificación del gen 16S rRNA 37
8.3 Resultados de la técnica de PCR detección del gen PKSI, PKSII Y NRPS 39
8.3.1 Determinación de las concentraciones para la técnica de PCR 39
8.3.2 Amplicones para los Genes PKSI, PKSII YNRPS 42
8.4 Interpretación de datos presencia de los genes PKSI, PKSII Y NRPS en PCR 46
9 Interpretación de resultados de las técnicas PCR y Enfrentamiento directo 48
9.1 Actividad antimicrobiana vs presencia de genes biosintéticos 48
10. Análisis estadístico 50
10 Discusión 51
12 Conclusiones 61
Referencias bibliográficas 63 | spa |
dc.format.extent | 68p. | spa |
dc.format.mimetype | application/pdf | spa |
dc.language.iso | spa | spa |
dc.publisher | Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca | spa |
dc.rights | Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, 2018 | spa |
dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ | spa |
dc.title | Analisis de la presencia de los complejos enzimaticos Pksi, Pksii y Nrps por Pcr y/o enfrentamiento directo en actinobacterias aisladas del rio Arauca | spa |
dc.type | Trabajo de grado - Pregrado | spa |
dc.description.degreelevel | Pregrado | spa |
dc.description.degreename | Constructor(a) y Gestor(a) en Arquitectura | spa |
dc.publisher.faculty | Facultad de Ingeniería y Arquitectura | spa |
dc.publisher.place | Bogotá D.C | spa |
dc.publisher.program | Construcción y Gestión en Arquitectura Ciclo Profesional | spa |
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dc.subject.lemb | Compuestos Microbianos | |
dc.subject.lemb | Bioactivos | |
dc.subject.lemb | Investigación | |
dc.subject.lemb | Identificación molecular | |
dc.subject.lemb | Actinobacterias | |
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